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UHPLC反相色譜柱的使用和操作方式
  • 更新日期:2021-05-23     信息來(lái)源:本站      瀏覽次數(shù):3026
    •    UHPLC反相色譜柱是一種具有*碳載量的固定相。高碳鏈覆蓋度使其具有密集的鍵和優(yōu)異的形狀選擇性,在PH低至1的環(huán)境中仍能保持良好的穩(wěn)定性。它主要應(yīng)用于傳統(tǒng)的C18柱無(wú)法分離的類胡蘿卜素的異構(gòu)體和其他長(zhǎng)烴基物質(zhì)的分離。

       
        UHPLC反相色譜柱的使用:
        在使用前,進(jìn)行柱的性能測(cè)試,并將結(jié)果保存起來(lái),作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。在做柱性能測(cè)試時(shí)要按照出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行,只有這樣,測(cè)得的結(jié)果才有可比性。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同。
       
        UHPLC反相色譜柱的操作方式:
        1、在條件允許情況下,在使用前對(duì)新色譜柱按照說(shuō)明書方法進(jìn)行柱效測(cè)試。以確保色譜柱的正常。
       
        2、所有硅膠基質(zhì)色譜柱使用溫度應(yīng)低于60℃。
       
        3、樣品
        將樣品溶解在流動(dòng)相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫,則需要將樣品溶解在初始流動(dòng)相或極性相近的溶劑中。樣品溶液不應(yīng)含有任何顆粒物,使用0.5μm或更小粒徑的濾膜過(guò)濾。樣品溶液如果使用強(qiáng)溶劑(例如,流動(dòng)相為水,樣品溶劑為甲醇),為達(dá)到較好峰形,需要降低進(jìn)樣量(以250x4.6mm規(guī)格為例,小于10μL)。
       
        4、流動(dòng)相
        所有流動(dòng)相,特別是含有緩沖鹽的流動(dòng)相,當(dāng)日實(shí)驗(yàn)當(dāng)日配制;如果使用了前日配制的流動(dòng)相,請(qǐng)確保流動(dòng)相pH值沒有變化,并確保流動(dòng)相沒有長(zhǎng)菌。流動(dòng)相的pH值取決于您的應(yīng)用和色譜柱填料類型。

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